PC12细胞系是来源于成年大白鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤的细胞系,培养PC12细胞系可观察PC12细胞动力学及其演化形成神经细胞与胶质细胞的过程。PC12细胞是一个常用的神经细胞株。PC12细胞株来源于一种可移植的鼠嗜铬细胞瘤,该细胞对神经生长因子(NGF)有可逆的神经元显形反应,该细胞不合成肾上腺素。
细胞培养用的马血清为细胞培养级。它经过多次过滤,祛除了许多大分子蛋白,但保留了血清中促细胞生长的活性因子,因而能用于细胞培养,例如神经细胞培养时,培养基中即需要添加马血清。
JBC上曾发表过一篇标题为:“NervegrowthfactorpreventsthedeathandstimulatestheneuronaldifferentiationofclonalPC12pheochromocytomacellsinserum-freemedium”的文章,探究了PC12细胞与马血清、细胞生长因子之间的关系。
在含马血清的培养基中,PC12细胞进行有丝分裂;当培养基中含有神经生长因子(NGF)时,细胞停止增殖,神经炎蔓延。
结果表明:
(a)PC12细胞在无血清培养基中不能存活。当离开血清时,90%的细胞在4-6天内死亡,99%在2-3周内死亡。
(b)如果在不添加血清的同时,添加神经生长因子,这些细胞进行翻倍生长,存在了至少1个月。
(c)增加神经生长因子培养超过2天后,在无血清条件下,细胞继续生存,细胞数量的增加。
(d)在无血清培养基中,NGD也能诱导PC12细胞的神经突生长。
(e)没有血清时,ngf处理的细胞表现出更少的细胞-细胞和神经突-神经突聚集。
(f)PC12在无血清培养基中生存和形态分化所需的2.5SNGF的最低水平约为10ng/ml(约0.4nM)。
(g)在无血清条件下停用神经生长因子会导致神经突变性和细胞丧失活力。
(h)山茶碱实验表明,NGF对存活和神经突生长的影响可能是不耦合的,并表明存活的影响是转录独立的。目前的结果也表明,PC12细胞对NGF有需求(类似于正常交感神经元),血清可能替代这一需求。此外,在化学定义的培养基中保持高度分化的细胞系的目前系统表明了某些实验机会。